公共營養(yǎng)師基礎(chǔ)知識：食物中脂肪酸成分的測定
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氣相色譜法
此方法測得的是食物中各種脂肪酸占總脂肪酸的百分比。樣品處理簡單，快速;方法準(zhǔn)確，靈敏度高。
1.原理
氣相色譜法是利用色譜柱中裝入擔(dān)體及固定液，用載氣把欲分析的混合物帶入色譜柱，在一定的溫度與壓力條件下，各氣體組分在載氣和固定液薄膜的氣液兩相相中的分配系數(shù)不同，隨著載氣的向前流動(dòng)，樣品各組分在氣，液兩相中反復(fù)進(jìn)行分配，使脂肪酸各組分的移動(dòng)速度有快有慢，從而可將各組分分離開。然后進(jìn)行分別測定。
2.適用范圍
此法適用于食物中脂肪酸的分析。轉(zhuǎn)自環(huán) 球 網(wǎng) 校edu24ol.com
3.儀器
氣相色譜儀
氫火焰離子化檢測器
氮?dú)?、氫氣、壓縮空氣
微處理機(jī)
色譜柱2m×4mm或3m×4mm填充80--100目ChromosorbW，涂以8%或10%(W/W)二乙二醇琥珀酸酯(DEGS)
氣相色譜條件
柱溫:210℃
進(jìn)樣器溫度：280℃
檢測器溫度：280℃
氮?dú)饬魉伲?0ml/cm2
4.試劑
所有試劑，如未注明規(guī)格，均指優(yōu)級純，所有實(shí)驗(yàn)用水，均為蒸餾水。
(1)石油醚(沸程30～60℃)分析純
(2)苯
(3)無水甲醇
(4)0.4mol/L氫氧化鉀--甲醇溶液：稱2.24g氫氧化鉀溶于少許甲醇中，然后用甲醇稀釋到10ml。
(5)脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)(SIGMA)
(6)脂肪酸混合標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)自環(huán) 球 網(wǎng) 校edu24ol.com
CHAIN%BYWT
6:01.0
8:05.0
10:04.0
12:027.0
14:010.0
16:010.0
18:02.0
18:115.0
18:225.0
18:31.0
5.操作步驟
稱取30--100mg(約2-6滴)油脂，置入10ml量瓶內(nèi)，加入1-2ml30~60℃沸程石油醚和苯的混合溶劑(1：1)，輕輕搖動(dòng)使油脂溶解。加入1-2ml0.4mol/L氫氧化鉀-甲醇溶液，混勻。在室溫靜置5～10分鐘后，加蒸餾水使全部石油醚苯甲酯溶液升至瓶頸上部，放置待澄清。如上清液渾濁而又急待分析時(shí)，可滴入數(shù)滴無水乙醇，1-2分鐘內(nèi)即可澄清。吸取上清液，在室溫下吹入氮使?jié)饪s，所得到濃縮液即可用于氣層分析。
6.結(jié)果計(jì)算
在有微處理機(jī)的情況下，用歸一化計(jì)算法則可自動(dòng)打印出峰面積和各種脂肪酸占總脂肪酸的百分比。歸一化計(jì)算法不能直接計(jì)算脂肪酸的總重量及各種脂肪酸的實(shí)際含量。
7.注意事項(xiàng)
同一樣品的兩次測定值之差不得超過兩次測定平均值的5%。
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